Bagaimana untuk mengelakkan salah faham yang biasa dalam penggunaan tip pipet yang mengikat rendah?

Petua Pipet Mengikat Rendah boleh mengurangkan sisa sampel dengan ketara kerana reka bentuk permukaan dalaman hidrofobiknya, dan sangat sesuai untuk mengendalikan reagen mahal, cecair likat atau sampel jejak (seperti protein dan asid nukleik). Walau bagaimanapun, jika mereka tidak dikendalikan dengan betul, mereka masih boleh menjejaskan ketepatan dan kebolehulangan eksperimen. Berikut adalah analisis kesilapan dan penyelesaian biasa yang digunakan dalam kombinasi dengan spesifikasi operasi makmal:

Salah faham 1: Mengabaikan pra-pembandaran tip

Operasi yang salah: Secara langsung aspirasi sampel dan tolak langkah pra-gulung.

Kesan: Walaupun petua pipet yang mengikat rendah dapat mengurangkan residu, untuk sampel seperti serum, protein atau pelarut organik, dinding dalaman mereka masih boleh membentuk filem mikro-cecair akibat ketegangan permukaan, mengakibatkan jumlah pipet awal yang rendah.

Pendekatan yang betul: Sebelum pipet formal, ulangi aspirasi pelepasan 2 hingga 3 kali dengan sampel yang sama untuk membentuk lapisan filem cecair yang stabil di dinding dalaman hujung (kecuali cecair suhu tinggi/rendah).

Salah faham 2: kelajuan aspirasi terlalu cepat atau sudutnya condong

Operasi yang salah: Aspirasi cecair dengan cepat atau pipet condong lebih daripada 20 °.
Kesan:

Pipet terlalu cepat: gelembung atau sedutan belakang (cecair bergegas ke dalam pipet dan mencemarkan omboh);
Pipet condong: Mengubah tekanan permukaan cecair, mengakibatkan jumlah pipet yang tidak tepat dan peningkatan jumlah sisa. Pendekatan yang betul:
Pipet perlahan -lahan dan lepaskan perlahan -lahan: beroperasi pada kelajuan malar dan mengawal kelajuan pelepasan omboh;
Pegang secara menegak: Pastikan sudut kecondongan ≤20 ° apabila hujung pipet direndam di permukaan cecair.
Salah faham 3: mengabaikan perbezaan operasi cecair likat
Operasi yang salah: Gunakan kelajuan pipet yang sama seperti cecair biasa untuk sampel kelikatan tinggi (seperti gliserol dan penggantungan sel).
Kesan: Cecair likat mengalir perlahan -lahan di dinding dalaman hujung pipet, dan pelepasan pesat akan menyebabkan peningkatan yang ketara dalam jumlah sisa, mengimbangi kelebihan reka bentuk penjerapan yang rendah.
Pendekatan yang betul:

Memperluas masa rendaman: Tinggal di permukaan cecair selama 1 saat selepas bercita -cita sebelum mengeluarkannya, dan jeda selama 1 saat sebelum menekan gear kedua untuk meniup cecair ketika melepaskan;
Pilih hujung pipet mulut: Untuk makromolekul atau sampel sel, gunakan hujung pipet penyerapan rendah mulut (70% lebih besar daripada aperture standard) untuk mengurangkan daya ricih.
Kesalahpahaman 4: Memukul keras semasa memasang tip
Operasi yang salah: berulang kali memukul pemegang pipet untuk "mengetatkan" hujungnya.
Kesan: Impak jangka panjang akan memakai komponen pengedap pipet, memusnahkan kedap udara, dan menyebabkan kebocoran atau kesilapan kelantangan.
Kaedah yang betul: Masukkan pipet secara menegak ke hujung, tekan ringan, dan sedikit putar kiri dan kanan agar sesuai.

Kesalahpahaman 5: Penyimpanan atau penggunaan semula yang salah
Operasi yang salah:

Letakkan pipet rata apabila terdapat cecair sisa di hujung;
Gunakan semula petua penyerapan rendah pakai buang untuk menjimatkan kos. Kesan:
Meletakkan penyebab rata -rata aliran balik cecair untuk menghancurkan musim bunga omboh;
Penggunaan semula boleh menjejaskan ketepatan kerana pencemaran silang atau ubah bentuk struktur. Kaedah yang betul:
Buang hujungnya selepas pipet, dan gantungkan pipet secara menegak;
Penggunaan semula adalah dilarang sama sekali, terutamanya apabila ia berkaitan dengan eksperimen sensitif seperti PCR dan isotop.
Nasihat Profesional: Memaksimumkan kelebihan Tips Rekalan Rendah
Padankan sifat cecair:
Cecair yang tidak menentu (seperti kloroform): Elakkan menggunakan petua pengetatan rendah biasa dan gunakan tip-tip selamat pelarut atau pipet omboh luaran yang direka untuk reagen yang tidak menentu.
Pengesahan penentukuran:
Secara kerap menimbang berat air tulen pipet dengan keseimbangan analisis (1ml = 0.9982g pada 20 ℃) ​​untuk mengesahkan sama ada jumlah sebenar memenuhi standard.
Ringkasan Mata Utama: Petua Rekalan Rendah meningkatkan ketepatan dengan mengurangkan kerugian sampel, tetapi jika butiran operasi diabaikan, ia mungkin masih tidak produktif. Pemasangan standard, kawalan kelajuan, penyesuaian kepada ciri-ciri sampel dan penggunaan satu kali yang ketat adalah asas untuk mencapai eksperimen kebolehulangan yang tinggi.