Memahami petua pipet mengikat rendah

1. Apakah petua pipet yang mengikat rendah?

Petua Pipet Mengikat Rendah adalah bahan habis makmal yang direka untuk pipettor (pipet) yang mempunyai rawatan permukaan khas dan/atau dibuat dari bahan tertentu. Objektif reka bentuk teras mereka adalah untuk dengan ketara mengurangkan penjerapan sampel dan pengekalan di dinding dalaman hujung .

Masalah teras: Petua polipropilena stdanard mempunyai permukaan dengan hidrofobisiti dan caj yang wujud, yang boleh menyebabkan penjerapan tidak spesifik komponen sampel tertentu, terutamanya biomolekul (seperti protein, asid nukleik) dan larutan likat.
Penyelesaian: Petua mengikat yang rendah mengubah sifat permukaan dinding dalaman melalui kaedah fizikal atau kimia, menjadikannya lebih hidrofilik dan tidak aktif, dengan itu mengurangkan daya interaksi antara molekul dan dinding hujung.

2. Bagaimana mereka berfungsi (teknologi rawatan permukaan)

Kesan mengikat yang rendah terutamanya dicapai melalui teknologi berikut:

Aditif Polimer Khas: Menggabungkan bahan tambahan polimer tertentu (mis., Pengubah hidrofilik) ke dalam bahan asas polipropilena semasa pengeluaran, memberikan badan tip yang melekat sifat mengikat rendah. Ini adalah arus perdana semasa dan kaedah yang paling stabil.
Lapisan permukaan:
- Salutan hidrofilik: Memohon salutan hidrofilik (mis., Salutan polimer tertentu) ke dinding dalaman untuk meningkatkan kebolehpercayaan permukaan, mengurangkan pengekalan cecair dan penjerapan protein.
- Salutan lengai: Memohon salutan yang sangat lengai (mis., Derivatif silane tertentu) untuk mengurangkan tapak aktif permukaan dan meminimumkan penjerapan kimia.
Rawatan Permukaan Khas: Mengubah mikrostruktur dan sifat kimia permukaan polipropilena melalui kaedah fizikal (mis., Rawatan plasma) atau etsa kimia untuk meningkatkan hidrofilik.
Polypropylene kesucian ultra tinggi: Menggunakan bahan mentah polipropilena dengan kdanungan kekotoran yang sangat rendah untuk mengurangkan potensi tapak penjerapan yang disebabkan oleh kekotoran.

3. Kelebihan dan ciri utama

Meminimumkan kehilangan sampel: Ini adalah kelebihan teras. Dengan ketara mengurangkan penjerapan dan pengekalan sampel berharga, berkonsentrasi rendah, atau minit (mis., Protein, DNA, RNA, enzim, antibodi, penggantungan sel, reagen likat) di dinding hujung, memastikan pipet ketepatan and pemulihan .
Meningkatkan ketepatan eksperimen dan kebolehulangan: Penyerapan yang dikurangkan bermakna jumlah pengurangan yang lebih konsisten, menurunkan kesilapan eksperimen yang disebabkan oleh pengalihan sampel, dan peningkatan hasil kebolehpercayaan and kebolehulangan semula .
Mengurangkan risiko pencemaran silang: Pengusiran cecair yang lebih lengkap dan kurang residu sampel menurunkan risiko pencemaran silang apabila secara berurutan menapis sampel yang berbeza.
Sesuai untuk aplikasi sensitif: Meminimumkan kesan ke atas aktiviti sampel, menjadikannya sangat sesuai untuk eksperimen sensitif penjerapan dalam biologi molekul, biologi sel, proteomik, diagnostik, dll.
Meningkatkan kebolehkerjaan: Biasanya mempamerkan hidrofilik yang lebih baik, yang membolehkan cecair mengalir dengan lebih lancar di dalam hujung, mengurangkan pematuhan meniscus dan pembentukan gelembung, yang membawa kepada operasi pipet yang lebih lancar.

4. Aplikasi utama (yang eksperimen terutamanya memerlukannya?)

Petua mengikat yang rendah sangat disyorkan, hampir penting, untuk aplikasi berikut:

Biologi Molekul:
- High-throughput PCR, qPCR, DDPCR: Mengurangkan kehilangan DNA/templat, memastikan kecekapan penguatan dan ketepatan kuantifikasi.
- Penyediaan Asid Nukleik & Penyediaan Perpustakaan: Mencegah kehilangan serpihan DNA/RNA berharga semasa pembersihan.
- Penyediaan sampel NGS: Pipet tepat perpustakaan minit adalah kritikal.
Penyelidikan Protein:
- Ujian kepekatan protein (BCA, Bradford, dan lain -lain): Menghalang penjerapan protein yang membawa kepada pengurangan kepekatan.
- Ujian Aktiviti Enzim/Kinetik: Memastikan kuantiti enzim yang tepat dan mengelakkan kehilangan aktiviti.
- Penyediaan sampel blot Barat: pipet tepat protein dalam buffer yang mengandungi SDS atau ejen pengurangan.
- Penyucian protein (mis., Koleksi Fraksi Kromatografi Affinity): Menghindari kehilangan protein sasaran.
Budaya Sel & Eksperimen Berkaitan:
- Passaging/penyaduran sel -sel sel berharga atau sel utama: Mengurangkan kehilangan lekatan sel di dalam hujung.
- Ujian daya maju sel: Pipet yang tepat penggantungan sel dan reagen.
- Transfeksi: Pipet tepat DNA, RNA, kompleks reagen transfeksi.
Diagnostik & Ujian Klinikal: ELISA, immunoassays chemiluminescent, POCT: Memastikan sampel dan jumlah reagen yang tepat, meningkatkan kepekaan dan ketepatan pengesanan.
Penyelesaian likat atau busa: Glycerol, DMSO, penyelesaian surfaktan, penampan tertentu: mengurangkan pengekalan dan pengangkut, meningkatkan ketepatan pipet.
Mana -mana percubaan yang melibatkan sampel berharga, minit, atau memerlukan ketepatan dan kebolehulangan yang tinggi.

5. Bagaimana untuk memilih tip pipet mengikat rendah yang betul?

Keserasian: Keperluan utama ialah mereka mesti Jadilah serasi dengan jenama dan model pipet anda. Sentiasa sahkan senarai keserasian atau rujuk panduan pengilang sebelum membeli.
Pensijilan & Kualiti:
- RNase/DNase/Pyrogen-Free yang disahkan: Penting untuk eksperimen biologi molekul dan budaya sel. Memastikan pensijilan yang boleh dipercayai.
- Perencat PCR yang disahkan: Sangat penting untuk aplikasi PCR/QPCR.
- Kualiti Pembuatan: Pembuatan berkualiti tinggi memastikan dimensi yang tepat, bentuk yang konsisten, ketiadaan burrs, dan kekurangan pencemaran zarah (gred kebersihan). Pilih jenama yang bereputasi.
Tahap prestasi mengikat rendah: Prestasi boleh berbeza -beza antara jenama dan siri. Beri perhatian kepada data prestasi yang disediakan oleh pengeluar (mis., Laporan ujian residu penjerapan protein). Untuk aplikasi yang sangat menuntut (contohnya, penjujukan sel tunggal, pengesanan protein kelimpahan ultra-rendah), petua mengikat rendah peringkat atas mungkin diperlukan.
Pembungkusan & Kemandulan:
- Format pembungkusan: Racked (disusun atau pukal), dibungkus, ditapis (pilihan). Pilih pembungkusan yang sesuai dengan aliran kerja dan keperluan automasi anda.
- Petua yang ditapis: Jika menghalang pencemaran aerosol aci pipet diperlukan, pilih petua mengikat yang rendah dengan penapis (tips penapis mengikat rendah). Penapis itu sendiri juga harus mengikat rendah.
- Pra-disterilkan: Kebanyakan eksperimen memerlukan petua pra-disterasi (biasanya gamma disinari). Sahkan kaedah pensterilan dan tahap jaminan kemandulan (SAL). Petua bukan steril sesuai untuk beberapa aplikasi tidak kritikal atau jika makmal melakukan pensterilan sendiri.
Keberkesanan kos: Petua mengikat yang rendah biasanya lebih mahal daripada tip standard. Menilai keberkesanan kos semasa memenuhi keperluan prestasi. Jangan berkompromi dengan eksperimen kritikal dengan menggunakan tip standard untuk menjimatkan kos, kerana data yang tidak tepat atau kerugian sampel boleh menyebabkan sisa yang lebih besar.

6. Nota Penggunaan

Lampiran yang betul: Pastikan hujungnya selamat dan dilekatkan pada pipet tanpa jurang untuk mengelakkan kebocoran udara dan jumlah yang tidak tepat.
Pra-basah: Untuk cecair likat atau tidak menentu, pra-basah (aspirasi dan mengeluarkan cecair beberapa kali sebelum pemindahan sebenar) kadang-kadang dapat meningkatkan ketepatannya (walaupun dengan tip mengikat yang rendah). Ikuti garis panduan operasi pipet.
Elakkan hujung hujung yang menyentuh: Mengekalkan kemandulan dan mencegah pencemaran.
Penyimpanan: Simpan di tempat yang sejuk dan kering dari cahaya matahari langsung dan debu. Perhatikan tarikh luput pada pembungkusan.